水稻條紋葉枯病干擾病毒基因表達載體的構建方法及其用途，涉及防治水稻條紋葉枯病技術領域，屬于生物和現代農業技術領域的應用技術。先在干擾載體ｐＵＣＣＲＮＡｉ中插入兩段水稻條紋葉枯病病毒七個基因的任一片段，得到ＲＮＡ干擾載體重組質粒；然后將Ｒ...

水稻米香基因、包含水稻米香基因表達載體的構建方法及用途，涉及生物技術領域，特別是水稻育種基因技術。水稻米香基因的核苷酸總長為９０６６個堿基，包括起始密碼子ＡＴＧ上游１２４２堿基，基因區域５８５９堿基和終止密碼子ＴＡＡ下游１９６５堿基，編...

一種禽類原始生殖細胞的體外培養方法，涉及轉基因，動物克隆，珍稀動物的保存及組織與細胞工程等領域。將禽類原始生殖細胞接種到ＣＥＦ飼養層上，再使用在ＤＭＥＭ高糖培養基中添加１０％小牛血清、２％的雞血清、２ｍｍｏｌ／Ｌ　　Ｌ－谷氨酰胺、１ｍｍ...

奶牛皮膚冷凍保存方法，涉及種質資源保存、轉基因、低溫冷凍保存、組織工程等領域。將奶牛皮膚組織置于冷凍保護液中，用干冰熏蒸法冷凍至保護液凍結后，轉移置－８０℃的冷凍器中。本發明研究了冷凍劑對奶牛皮膚生長能力的毒性和保護性，通過研究建立冷凍...

一種獲得轉基因雞的方法，涉及基因工程技術領域。本發明用外源基因ｐＥＧＦＰ－Ｎ１質粒轉染精原干細胞，然后，在體內繼續分化，得到攜帶有外源基因的精子。利用這些攜帶有外源基因的精子，可獲得大量轉基因后代，應用于雞的生產性能的改良，種質資源的保...

一種雞精原細胞分離純化方法，涉及轉基因、珍稀物種的保存和組織與細胞工程等領域。本發明先分離雞精原細胞，然后進行Ｐｅｒｃｏｌｌ分離、貼壁純化，本發明首次對不同時期雞胚的睪丸，比較以組合酶和Ｐｅｒｃｏｌｌ介質梯度的分離方法，并依據睪丸細胞不...

小鼠皮膚冷凍保存方法，涉及種質資源保存、轉基因、低溫冷凍保存、組織工程等領域。將小鼠皮膚組織置于冷凍保護液中，用干冰熏蒸法冷凍至保護液凍結后，轉移置－８０℃的冷凍器中。通過本發明可獲得對小鼠組織冷凍保存，解凍后，皮膚組織生長能力。本發明...

高表達水平的轉基因動物乳腺特異性載體的構建方法，生物工程技術領域，該技術應用于制備轉基因動物乳腺生物反應器。以巨細胞病毒部分非編碼序列為增強子序列，將巨細胞病毒增強子序列構建在動物乳蛋白調控序列和功能基因之間，組成乳腺特異性表達載體。本...

本發明公開了一種禽類精原干細胞的體外培養方法，涉及轉基因，動物克隆，珍稀動物的保存及組織與細胞工程等領域。將禽類精原干細胞接種到ＣＥＦ飼養層上，再使用在ＤＭＥＭ高糖培養基中添加１０％小牛血清、２％雞血清、２ｍｍｏｌ／Ｌ　　Ｌ－谷氨酰胺、...

一種獲得雞ＥＰＧＣｓ單細胞克隆的方法，其特征是利用第四代的雞ＥＰＧＣｓ進行單細胞克隆制備，并對克隆制備的單細胞進行培養和傳代，獲得遺傳均一的雞ＥＰＧＣｓ細胞。本發明方法簡便易行，無需特殊的儀器要求，采用常規的細胞培養操作即可完成單細胞克...

本發明公開了一種定向誘導雞胚精原干細胞分化為成骨細胞的方法，屬于細胞工程技術領域。其特征是將所提取獲得的雞精原干細胞接種于無飼養層培養瓶內，利用條件培養液進行誘導培養，所述培養液為：ＤＭＥＭ高糖培養基中含有１０％小牛血清、２％的雞血清、...

本發明公開了一種在體外對雞胚原始生殖細胞進行定向誘導分化培養能獲得成骨細胞的方法。采用由９０％ＤＭＥＭ、１０％ＦＢＳ、５．５×１０↑［－５］β－巰基乙醇、１×１０↑［－７］ｍｏｌ／Ｌ地塞米松、０．０１ｍｏｌ／Ｌ　　β－甘油磷酸鈉、０．０...

一種定向誘導雞胚原始生殖細胞向脂肪細胞分化的方法，屬于治療性克隆、細胞工程、組織工程技術領域。本發明采用誘導劑Ⅰ（９０％ＤＭＥＭ＋１０％ＦＢＳ＋５．５×１０↑［－５］β－巰基乙醇＋１×１０↑［－６］ｍｏｌ／Ｌ地塞米松＋１０ｍｇ／Ｌ胰島素...

本發明公開了一種家豬耳皮膚組織冷凍保存方法，其特征是將家豬耳皮膚組織置于冷凍保護液中，先在環境溫度為１８～２４℃條件下平衡２０～３０分鐘，然后用液氮蒸氣熏蒸至冷凍保護液結凍后，再將家豬耳皮膚組織置于液氮面上８～２０小時后，投入液氮中保存...

人工抗原遞呈細胞及其制備方法，涉及一種新型抗原遞呈細胞的制備方法。以人慢性粒細胞白血病細胞株Ｋ５６２細胞為載體，轉染表達ＣＤ３２ａ的真核表達載體，通過Ｇ４１８篩選，流式細胞儀分選將ＣＤ３２分子穩定表達在Ｋ５６２細胞表面，形成Ｋ３２細胞；...

重組雞痘病毒疫苗ｒＦＰＶ－１２１８ＡＩＨ９及其制備方法、用途，涉及一種重組雞痘病毒疫苗，特別是一種用雞痘病毒新鑒定的復制非必需區構建表達Ｈ９亞型禽流感病毒血凝素基因的重組雞痘病毒疫苗。將含Ｈ９亞型ＡＩＶ　　ＨＡ基因置于啟動子下游，插入到...

本發明涉及基因工程領域，具體是涉及一種鎂離子調控下的表達噬菌體裂解基因破壁方法。所說的鎂離子調控下的表達噬菌體裂解基因的破壁方法，其特征是，將噬菌體裂解基因克隆進受鎂離子調控的表達載體ｐＹＳ，再轉化進宿主菌，然后通過控制Ｍｇ↑［２＋］的...

重組雞痘病毒疫苗ｒＦＰＶ－１２１８ＡＩＨ５／Ｎ１及其構建方法、用途，涉及一種重組雞痘病毒疫苗的構建技術。先分別將含Ｈ５亞型ＡＩＶ　　ＨＡ基因片段和含Ｈ５亞型ＡＩＶ　　ＮＡ基因片段置于各自啟動子下游，插入到含ＦＰＶ復制非必需片段ＦＰＶ１２...

重組雞痘病毒疫苗ｒＦＰＶ－１２１８ＡＩＨ５／Ｈ９及其構建方法、用途，涉及重組雞痘病毒疫苗構建技術領域。先分別將含Ｈ５亞型ＡＩＶ　　ＨＡ基因片段和含Ｈ９亞型ＡＩＶ　　ＨＡ基因片段置于各自啟動子下游，背向串聯插入到含ＦＰＶ復制非必需片段ＦＰ...

雞痘病毒表達載體ｐ１２－１８及其構建方法，涉及雞痘病毒表達載體構建技術領域，先采用篩選雞痘病毒的新復制非必需區，擴增雞痘病毒復制非必需區ＦＰＶ１２－１８的兩個側翼區；再將復制兩個側翼區、標記基因表達框Ｐ１１－ＬａｃＺ先后克隆入載體ｐＢｌ...